肝内胆管癌(Intrahepaticcholangiocarcinoma，ICC)是第二大肝癌类型，目前标准治疗方法为吉西他滨/顺铂化疗，中位生存期不足一年。近期的研究表明ICC病灶中异柠檬酸脱氢酶(Isocitratedehydrogenase,IDH)突变率为~18-37%，突变通常发生在IDH1(R)和IDH2(R,R)。野生型的IDH酶催化异柠檬酸生成α酮戊二酸，而突变型IDH酶催化α酮戊二酸生成2-羟戊二酸。2-羟戊二酸为“癌症代谢产物”，2-羟戊二酸可竞争性抑制TET酶，TET酶利用氧将5-甲基胞嘧啶(5-mC)转变为5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)。5-mC和5-hmC都是DNA的表观遗传修饰，此结果导致细胞的表观遗传学发生改变，诱发癌症的产生。
近期的研究中，IDH2抑制剂可使IDH2突变的AML患者受益，另一项IDH1突变抑制剂AG的临床一期结果表明AG对IDH1突变的实体瘤患者具有稳定疾病作用。该论文研究组利用高通量筛选技术，发现与未突变的ICC细胞相比，达沙替尼对IDH1突变的ICC细胞具有及高的敏感性，为IDH突变的ICC患者提供潜在治疗手段。
达沙替尼特异性抑制IDH突变型ICC细胞生长
该研究小组科学家首先分析17株胆道癌细胞系，发现两株ICC细胞系RBE(RS)和SNU-(RC)存在IDH1突变，IDH1抑制剂AGI-可抑制这两株细胞产2HG能力，但不能抑制细胞生长(图1)。
图1
为了攻克这类肿瘤疾病，研究人员首先用该17株细胞系去筛选种FDA已批准的或正在临床试验的化合物，结果发现只有达沙替尼对IDH1突变的RBE和SNU-细胞具有明显生长抑制作用(图2)。
图2
然后研究人员继续用IDH1突变或未突变的人及鼠科细胞系检测达沙替尼的抑制活性，结果表明达沙替尼只对IDH1突变的细胞系具有明显生长抑制作用(图3)。
图3
研究人员将IDH1突变的SS49细胞移植到裸鼠内，用达沙替尼每日50mg/kg处理，与对照组相比，达沙替尼可显著抑制肿瘤生长(图4)。
图4
IDH突变的ICC细胞生长依赖SRC通路
为了确定达沙替尼对ICC细胞生长抑制的作用机制，研究人员分析了达沙替尼对野生型及IDH突变型ICC细胞MAPK通路、JAK/STAT通路、凋亡相关蛋白等主要肿瘤信号相关通路的影响。结果发现只有IDH突变的细胞mTORC1复合物p-p70S6K和p-S6的激活被达沙替尼抑制(图5)。
图5
然而，科学家的探索并未停歇，他们还想找到达沙替尼的直接作用靶点。研究人员用达沙替尼处理IDH突变的ICC，然后用MIB法分析了超多40种激酶的激活情况，结果发现SRC，YES1，LYN，DDR1，ABL1和ABL2激酶被显著抑制。研究人员进一步用CRISPR/Cas9技术逐个突变上述激酶，最终发现SRC突变的细胞对达沙替尼展现高不敏感性(图6)，说明达沙替尼作用靶点为SRC。
图6
为了证实上述结论，研究人员将IDH1突变的RBE细胞进行SRC突变，然后用达沙替尼处理，与SRC未突变相比，SRC突变的细胞展示出对达沙替尼的高不敏感性(图7)。
图7
因此，该论文作者提出IDH突变的ICC细胞生存依赖于SRC信号通路，由于目前IDH抑制剂对IDH突变型ICC细胞敏感性差，该研究对于治疗IDH突变型ICC患者提供了新的视野。抑制SRC信号通路，对IDH突变型ICC患者可能具有治疗效果，与IDH抑制剂的联合使用也有可能具有协同作用，然而作者在对其他IDH突变的实体瘤，比如肺癌，软骨肉瘤的研究中发现，达沙替尼并无抑制作用。该研究小组已启动达沙替尼治疗IDH突变型ICC患者的临床一期试验。
注：本文图片均摘自参考文献
参考文献
IsocitratedehydrogenasemutationsconferDasatinibhypersensitivityandSRCdependenceinintrahepaticcholangiocarcinoma.CancerDiscovery.Jul,6(7):-
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